Реагент для трансфекции SweTransDNA

 

Название продукта	Кот. Нет.	Спец.
Реагент для трансфекции SweTransDNA	Г1805-0.5ML	0,5 мл

 

 

Этот продукт представляет собой реагент для трансфекции ДНК нового поколения с превосходными характеристиками катионного типа полимера, который обладает превосходной способностью связывания и доставки ДНК и может использоваться для трансфекции плазмидной ДНК. Этот продукт обладает преимуществами очень низкой токсичности, хорошей стабильности, простой и легкой трансфекции, хорошей воспроизводимости и т. д. Его можно использовать для временной и стабильной трансфекции многих типов клеток.

 

 

Корабль с мокрым льдом; Хранить при температуре 2-8 в течение 12 месяцев.

 

 

Компонент	Г1805-0.5ML
Реагент для трансфекции SweTransDNA	0,5 мл
Руководство	1 шт.

 

 

1. Подготовка адгезивных клеток перед трансфекцией (например, 6-луночный планшет, другие характеристики указаны в прилагаемой таблице):

а. За день до трансфекции клетки равномерно высаживают в луночный планшет с подходящей плотностью так, чтобы клетки сходились до 60-85% во время формальной трансфекции;

б. Перед трансфекцией удалите исходную среду для культивирования клеток, промойте клетки буфером PBS комнатной температуры 1-2 раз, а затем замените 1,9 мл бессывороточной среды или базальной среды с низким содержанием сыворотки (менее 5%) (другие клетки имеют различную зависимость от сыворотки, пожалуйста, отрегулируйте процентное содержание сыворотки соответствующим образом);

в. После замены жидкости и приготовления комплексов для трансфекции клетки помещают в инкубатор для клеточных культур;

2. Подготовка суспензии клеток для трансфекции:

а. В день трансфекции, после центрифугирования соответствующего количества клеток для удаления среды, ресуспендируйте клетки в базальной среде без сыворотки или с низким содержанием сыворотки (5% или менее) до соответствующей концентрации и равномерно инокулируйте 1,9 мл ресуспензии. в луночном планшете;

б. Поместите луночный планшет, инокулированный суспендированными клетками, в инкубатор для клеточных культур и начните готовить трансфекционный комплекс (объемное соотношение между трансфекционным комплексом и культуральной средой можно соответствующим образом регулировать, обращаясь к соотношению прикрепившихся клеток);

3. Приготовление трансфекционного комплекса:

а. Приготовьте раствор А: 50 мкл бессывороточной базальной среды с 2 мкг плазмидной ДНК, взорванной и хорошо перемешанной;

б. Приготовление раствора B: 50 мкл бессывороточной базальной среды с 2-10 мкл реагента для трансфекции SweTransDNA продували и смешивали;

в. Оставьте жидкость A и жидкость B при комнатной температуре на 5 минут;

д. Добавьте жидкость B к жидкости A, осторожно продуйте, чтобы хорошо перемешать, и продолжайте инкубировать при комнатной температуре в течение 20 минут для образования комплекса реагентов ДНК-трансфекции;

4. Трансфекция клеток:

а. Комплекс реагентов ДНК-трансфекции, полученный на предыдущем этапе, добавляют в планшет с отверстием, заменяя жидкость на «Шаге 1» или «Шаге 2»;

б. После осторожного встряхивания культурального планшета для того, чтобы среда, содержащая трансфекционный комплекс, хорошо смешалась со средой в луночном планшете, луночный планшет инкубируют при 37 градусах в инкубаторе с 5% CO2;

в. После 4-6 ч инкубации различные клетки заменяют соответствующей свежей средой и помещают в инкубатор для дальнейшей инкубации;

д. Через 24-48 ч трансфекции клетки наблюдают или собирают.

 

 

1. Используйте здоровые клетки в хорошем состоянии, а реанимированные клетки рекомендуется пассировать как минимум дважды перед трансфекцией.

2. Используйте высококачественную плазмидную ДНК, не содержащую эндотоксинов.

3. Товар используется впервые, его рекомендуется упаковывать отдельно во избежание повторного замораживания и оттаивания.

4. Учитывая клеточную толерантность, время инкубации комплекса реагентов ДНК-трансфекция может быть соответствующим образом продлено, и эффект трансфекции будет лучше. Соотношение ДНК и реагентов для трансфекции можно корректировать по мере необходимости.

5. Для вашего здоровья и безопасности во время работы надевайте лабораторный халат и перчатки.

 

Таблица: Количество реагентов для трансфекции и ДНК, необходимое для разных культуральных планшетов.

Культурное блюдо	Площадь одной скважины	Количество инокулированных клеток	трансфекция ДНК		Общий объем
			Реагент для трансфекции	ДНК
96-луночный планшет	0.3 см²	(2.0-4.0)×104	0.2-1.0 μL	0.2 мкг	0.1 мл
24-луночный планшет	2.0 см²	(1.2-2.4)×105	0.4-2.0 μL	0.4 мкг	0,5 мл
12-луночный планшет	4.0 см²	(2.4-4.8)×105	1.0-5.0 μL	1.0 уг	1.0 мл
6-луночный планшет	9,5 см²	(6.0-10)×105	2.0-10 μL	2.0 уг	2.0 мл

 

Только для исследовательского использования!

 

 

горячая этикетка : Реагент для трансфекции swetransdna, Китай Реагент для трансфекции swetransdna производители, поставщики, завод